頂空色譜分析方法-2

   將頂空色譜分析方法常用的設備拍成照片，圖-1樣品瓶有兩種體積（9mL,12mL），根據樣品用量不同選用；圖-2密封鉗（紅色為封瓶口鉗，黑色為開(kāi)瓶口鉗）；圖-3取樣器（從50μL~1000μL）能準確吸取液體樣品的重要工具；圖-4加熱塊（俯視和正視可調溫度加熱塊圖，用來(lái)加熱樣品瓶）。一般用10~25μL注射器抽取液上氣體進(jìn)樣。
二、試劑和樣品
⒈ 標準樣品 含內標的乙醇溶液：用0.9%生理鹽水配制0.4%乙醇和0.2%特丁醇（內標）；內標溶液：用0.9%生理鹽水配制0.2%特丁醇（內標）；混合標樣：用0.9%生理鹽水配制甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、異丁醇和特丁醇七種醇各0.7%。
⒉ 被測樣品——⑴ 提取死者肖小寶心血和胃內容各5mL  ⑵ 呂某的靜脈血各4mL，密封、冰凍保存立即送檢
三、條件和圖譜
        ⒈ 色譜條件——柱溫：填充柱在100℃~160℃，毛細柱在40℃~60℃。柱前壓：填充柱在270~350kpa，毛細柱在150~180kpa。樣品瓶加熱溫度：均在75℃~85℃。樣品瓶加溫平衡時(shí)間：一般選用20~25min。
　?、?nbsp;結果圖譜——



四、結果和討論
⑴ 加有內標（特丁醇）含乙醇樣品的定量分析，在數據處理條件設置合適情況下（如在含量低時(shí)，內設值峰寬不能用5而應改為2、zui小面積相應改為100，不能設為500等），實(shí)踐證明，采用土法頂空進(jìn)樣分析結果一樣準確可靠，保留了頂空色譜分析方法的全部?jì)?yōu)點(diǎn)。

⑵ 樣品加熱平衡時(shí)間長(cháng)點(diǎn)好，一般設為20min-25min，邊加熱邊小振搖，有利乙醇的揮發(fā)。注射器在使用之前也需預熱，并用被測樣品瓶中氣體洗滌飽和后方可進(jìn)樣。

⑶ 當頂空進(jìn)樣器壞了或分析不準確時(shí)，也有采用三氯乙suan沉淀蛋白，高速離心后，直接將上清液進(jìn)樣，這是一種要求在高溫下進(jìn)樣，對柱子的污染會(huì )少點(diǎn)，但容易造成分離不*，計算不準確的后果。

⑷ 土法頂空進(jìn)樣與頂空進(jìn)樣器進(jìn)樣主要不同在加熱塊升溫、樣品瓶加熱和振搖、抽取液上氣體和注入色譜儀進(jìn)樣口等，全過(guò)程均為人工控制，手動(dòng)完成，與頂空進(jìn)樣器全過(guò)程是自動(dòng)化不同，容易造成重現性差。如內標物選擇適當，操作誤差不影響分析結果，但同一時(shí)間內平行操作十分重要。

⑸ 土法頂空進(jìn)樣需用注射針，一般使用10-25μL或1.0mL體積，在進(jìn)樣前需將注射針先預熱，用被測液上氣相抽洗或飽和注射針，然后抽取所需體積的氣體注入氣相色譜進(jìn)樣口，全部操作在相同條件下進(jìn)行。